ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | TSH小鼠促甲狀腺素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Mouse Thyroid Stimulating Hormone, TSH Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-M64313 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
磷化分裂周期蛋白25C抗體Pseudotaraxasrol別名: 20-Taraxasn-3-ol分子式: C30H50O性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 苦苣菜屬；野馬追；蒲公英烷；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
磷化周期素依賴性激酶2抗體Dammar-20(21)-ene-3β,24,25-triol別名: 分子式: C30H52O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 米仔蘭；達(dá)瑪烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體24,25-Epoxydammar-20(21)-en-3-one別名: 分子式: C30H48O2性狀: Cryst.純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 達(dá)瑪烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體2α,24-Dihydroxyursolic acid別名: 2,3,24-Trihydroxy-12-ursen-28-oic acid分子式: C30H48O5性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 烏蘇烷；烏索烷；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
CD134抗體β-Amyrin別名: 分子式: C30H50O性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 齊墩果烷；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
單核趨化蛋白5抗體Quinovic acid 3-O-(6-deoxyglucoside) 28-O-glucosyl esr別名: 分子式: C42H66O14性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 烏蘇烷；烏索烷；三萜苷；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體Taraxasrol aceta別名: 分子式: C32H52O2性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗炎；牛角瓜；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
角蛋白13抗體Quinovin別名: Quinovic acid 3-O-β-D-quinovopyranoside分子式: C36H56O9性狀: Cryst.純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 魚(yú)骨木屬；烏蘇烷；烏索烷；三萜苷；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
TSH小鼠促甲狀腺素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理G氨基丁A型受體α6/GABAA Rα6抗體Monkey ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit
磷化γ1氨基丁受體GABAA Rβ1抗體Monkey IL-1α (Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit
G氨基丁受體β2/GABAA Rβ2抗體Monkey SDF-2 (Stromal Cell Derived Factor 2) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體17抗體Monkey GC (Glucagon) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體102抗體Monkey BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體136抗體Monkey GDF6 (Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體126抗體Monkey SAG (S Antigen) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體105抗體Monkey SDC4 (Syndecan 4) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
