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人促胃液素(GT)ELISA試劑盒說明書

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  • 更新時間2024-03-21
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上海滬鼎生物科技有限公司坐落于上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園,是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的專業(yè)生物公司。公司具有完善的實驗技術(shù)開發(fā)實驗室,成熟的抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種生物學技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團隊,可以有效的保證公司產(chǎn)品強的穩(wěn)定性和高的準確性,同時又具有競爭力的價格。公司目前可以提供多種生物學檢測試劑盒、進口常規(guī)生化試劑、抗體、化學試劑、藥典級試劑、標準品、血清等產(chǎn)品,覆蓋分子生物學、生物化學、細胞生物學、免疫學、蛋白組學、生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等生命科學的各個領(lǐng)域。公司以提供生命科學科研用檢測試劑為主,致力于為來自高等院校、科研機構(gòu)、診斷試劑生產(chǎn)廠家以及生物制藥公司的廣大客戶們提供高質(zhì)量生物產(chǎn)品。
上海滬鼎生物自主研發(fā)的ELISA試劑盒,現(xiàn)已涵蓋20多個種屬,數(shù)千種產(chǎn)品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領(lǐng)域。
公司與眾多國內(nèi)外大學、重點實驗室、科研院所、企事業(yè)單位有著長期的良好合作。且在合作過程中,公司所表現(xiàn)出的專業(yè)、務(wù)實和坦誠態(tài)度,獲得了合作者的極大贊譽。
上海滬鼎生物人特別感謝以下合作單位多年以來的支持與信任!
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人促胃液素(GT)ELISA試劑盒說明書用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人促胃液素(GT)的含量。
人促胃液素(GT)ELISA試劑盒說明書 產(chǎn)品詳情

一、詳細參數(shù)

【檢測方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)

【貯藏條件】:2-8°C

【產(chǎn)品有效期】:二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購買。

【產(chǎn)品主要成分】:酶標板,試劑,標準品等。

【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

【產(chǎn)品單價】(具體折扣),可免費代測,含稅含運費。

【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等

注:標本必須為液體,不含沉淀。

二、四大特性

1.特異性強:不與其它細胞因子反應(yīng)。

2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%

3.穩(wěn)定性高:實驗效果很穩(wěn)定。

4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990

三、具體操作方法

以雙抗體夾心法為例展示:

1、雙抗體夾心法檢測抗原         

操作步驟如下:

1)將特異性抗體與固相載體結(jié)合,形成固相抗體。洗滌除去尚未結(jié)

合的抗體及一些雜質(zhì)。

2)加入待測標本,保溫反應(yīng)。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3)加酶標抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關(guān)。

4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如 HBeAgHBsAghCG AFP等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標所使用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測。

在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標準曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同,如按常法測讀,所得結(jié)果將低于實際的含量,這種現(xiàn)象被為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴重時,反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中 HBsAgAFP 和尿液 hCG 等)時,應(yīng)注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。

四、客戶收集樣品要求

  ·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。

  ·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。

  ·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長期保存應(yīng)-70℃。

  ·樣本量的要求:若一個指標做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。

   ·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸。郵寄前請與溝通確認。

五、Elisa試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 7 終止液 6ml×1

2 酶標試劑 6ml×1 8 標準品(480ng/L0.5ml×1

3 酶標包被板 12 孔×8 9 標準品稀釋液 1.5ml×1

4 樣品稀釋液 6ml×1 10 說明書 1

5 顯色劑A 6ml×1 11 封板膜 2

6 顯色劑B 6ml×1/12 密封袋 1

六、Elisa試劑盒標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

七、操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

240ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

120ng/L 4 號標準品 150μl 5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

60ng/L 3 號標準品 150μl 4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

30ng/L 2 號標準品 150μl 3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

15ng/L 1 號標準品 150μl 2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。

八、咨詢和訂購的方法

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