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小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片

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小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
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產品名稱

生長特性

貨期

小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片

貼壁生長

35

細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性   貼壁生長
特征特性    1972年從C3H小鼠胚胎細胞中分離建立;在同系小鼠體內不能成瘤,未發現自發轉化;化學制劑很容易引起該細胞發生轉化,建議只用5~15代的細胞。
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法   2000cells/cm2傳代;2~3天換液1次。
傳代情況  不詳
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 
支原體檢測  培養法(- 
STR   -
同工酶

染色體 69~78

使用權限 A
小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3–80以下,再放入液氮槽期儲存。-20不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCCNIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片復蘇操作要點:
1)將培養基在37水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37溫箱培養。
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