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| 產品名稱 | GV3101 感受態細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 表達感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
FSA 人胚胎性硫糖蛋白抗原 規格： 48T/96T
CIAP 人牛小腸堿性磷酸酶 規格： 48T/96T
FⅫ 人*Ⅻ 規格： 48T/96T
FⅩⅢ 人*ⅩⅢ 規格： 48T/96T
FⅩ 人*Ⅹ 規格： 48T/96T
FⅨ 人*Ⅸ 規格： 48T/96T
Ⅷ-Ag 人*Ⅷ相關抗原 規格： 48T/96T
FⅢ 人*Ⅲ 規格： 48T/96T
FⅡ 人*Ⅱ 規格： 48T/96T
F1+2 人*原片段F1+2 規格： 48T/96T
T-TM 人*血栓調節蛋白復合物 規格： 48T/96T
TR 人*受體 規格： 48T/96T
TAT 人*抗*復合物 規格： 48T/96T
Gelsolin 人凝溶膠蛋白 規格： 48T/96T
CLU 人凝聚素 規格： 48T/96T
gelson 人凝膠原蛋白 規格： 48T/96T
UFC 人尿游離* 規格： 48T/96T
ALB 人尿微量白蛋白 規格： 48T/96T
UreC 人尿素酶相關蛋白C 規格： 48T/96T
PLAUR/uPAR 人*型纖溶酶原激活物受體 規格： 48T/96T
uPA/PLAU 人*型纖溶酶原激活物 規格： 48T/96T
uPA/PLAU 人*型纖溶酶原激活物 規格： 48T/96T
uPA 人*型纖溶酶原激活物 規格：
shēng huà shì jì 核糖核酸酶（牛胰） 容量： 25克
shēng huà shì jì 核糖核酸（酵母） 容量： RT 5克
GV3101 感受態細胞 100ul*50shēng huà shì jì 核酸組蛋白（小牛胸腺） 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 含鐵牛奶培養基 容量： 100克
shēng huà shì jì 海藻糖無水物 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 海藻酸鈉 容量： 25克
shēng huà shì jì 海藻酸 容量： 100克
shēng huà shì jì 海砂 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 過氧化物酶染液 容量： 10片/箱
shēng huà shì jì 過氧化物酶（辣根） 容量： 5克
shēng huà shì jì 過氧化氫尿素 容量： 500克
shēng huà shì jì 過氧化氫酶測試盒 容量： RT 20個/包
shēng huà shì jì 過氧化氫酶（牛肝） 容量： 1公斤
48T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
