臺(tái)盼藍(lán)染色液 （0.4%）50ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
臺(tái)盼藍(lán)染色液 （0.4%）50ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
臺(tái)盼藍(lán)染色液 （0.4%）50ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HCC827(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7

EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

LOVE1細(xì)胞，結(jié)直腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-29

人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]

ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0119HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IgG3 Others Mouse 小鼠 IgG3-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 MC3T3-E1 Subclone 14 in mouse parietal bone cell sub clone 14 before a-MEM培養(yǎng)基+10%FBS

OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞)
IL25 Others Rat 大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z

SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells

SK-N-SH細(xì)胞，人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg

SF767(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HCT-15(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒 Human VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit

人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： PR3 Ab-IgG ELISA Kit

RatInterleukin32,IL-32ELISA試劑盒大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanglutamicaciddecarboxylase,GADELISA試劑盒人*脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 人髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒

HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 人*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanArachidonicAcid,AAELISA試劑盒人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測(cè)試劑盒(包括萃取)20次

Humanthyroidhormoneautoantibodies,THAAELISAKit人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
臺(tái)盼藍(lán)染色液 （0.4%）50ml實(shí)驗(yàn)方法兔乙酰*(ACh)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝