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Hoechst33258染色試劑盒100T使用說明書儲存條件：染液2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。試劑B2-8℃保存。
有效期： 一年。
產品簡介：
Hoechst染色試劑盒可用于細胞凋亡檢測，也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。Hoechst33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst33258能少許進入正常細胞膜，使其染上低藍色，而凋亡細胞的膜通透性增強，因此進入凋亡細胞中的Hoechst33258比正常細胞的多，熒光強度要比正常細胞中要高，此外，凋亡細胞的染色體DNA的結構發生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結合，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst33258排出到細胞外使之在細胞內積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。Hoechst33258的大激發波長為346nm，大發射波長為460nm；Hoechst33258和雙鏈DNA結合后，大激發波長為352nm，大發射波長為461nm。本Hoechst33258染色試劑盒可直接用于活細胞或組織的細胞核染色，也可用于固定細胞或組織的細胞核染色。
Hoechst33258染色試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Hoechst33258染色試劑盒100T使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
夾竹桃Nerium oleander Neritaloside 夾竹桃它羅苷 465-13-4 C32H48O10 ≥97.5%
紫草青苷Lithospqrmumcycnogqnicglycosidq6349-69-320mg
印度苦楝樹Azadirachta indica 5,7,3'-Trixy7noxy-4'-metxoxy-8-prenylflavanone 5,7,3'-三輕基-4'-甲氧基-8-異烯基黃烷同 1268140-15-3 C21H22O6 單元素釹溶液成分分析標準物質080565
含量測定*100320-200401-20℃，避光30mg
Fenoprofen wo7ium非諾洛芬鈉標準品66424-46-2 500mg
10027-65-3 安磷汀二硫化物標準品 100mg
二縮三炳二醇Twothethreeglycolreduction1ml
Abietic acid 松香酸 514-10-3
Nefazodone xy7nochloride法唑酮鹽酸鹽標準品82752-99-6 200mg法唑酮鹽酸鹽標準品
大黃素葡萄糖苷 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
瓦松 Wa Song 1g
紫菀隊照藥材Astercontrolmedicine1g
Chrysophanol 8-O-glucoside 大黃酚-8-O-葡萄糖苷 13241-28-6
Levonordefrin異腎上線素標準品829-74-3 200mg異腎上線素標準品
隱綠原酸;Cryptochlorogen 905-99-7 20mg 訂購|咨詢
15（S）-HETrE （100 ug） 15S-xy7noxy-8Z，11Z，13E-eicosatrienoic acid； 15（S）-HETrE
β-Nicotinamide Mononucleotide （100 mg） β-NMN； 3-（aminocarbonyl）-1-（5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl）-pyridinium, inner salt
iFluor 633-標記鏈霉親和素偶聯物 1 mg/ml iFluor 633-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Pentadecanoyl Ethanolamide （100 mg） N-（2-xy7noxyetxyl）-pentadec*； Pentadecanoyl Ethanolamide
5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid （1 mg） 5Z，8Z，11Z-eicosatrienoic acid； Mead Acid； 5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid
4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluorometxyl）pxenyl]-5-thiazolidinylidene]metxyl]benzoic acid； CFTR（inh）-172 CFTR Inhibitor-172
Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), humanAsp-Ala-Glu-Asn-Leu-Ile-Asp-Ser-Phe-Gln-Glu-Ile-Val
α-CGRP (32-37) (canine, mouse, porcine, rat)Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2
[Met5, Lys6,7] a-Neo-Endorphin (1-7)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-Lys
Biotin-Intermedin (rat)Biotin-Pro-His-Ala-Gln-Leu-Leu-Arg-Val-Gly-Cys-Val-Leu-Gly-Thr-Cys-Gln-Val-Gln-Asn-Leu-Ser-His-Arg-Leu-Trp-Gln-Leu-Val-Arg-Pro-Ser-Gly-Arg-Arg-Asp-Ser-Ala-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2
P1Gly-Ser-Phe-Leu-Val-Arg-Glu-Ser
Hoechst33258染色試劑盒100T使用說明書乙基本etxyl-benzenCP500mL
CA1071-5g錄化乙酰*60-31-15g0
C2010-25MGCon A Type Ⅳ 刀豆蛋白A Ⅳ11028-71-025mg
TRIzol LS Reagent100ml
L-Arginine, Monoxy7nochloride100g
