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  • 更新時間2017-06-13
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上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑等為一體的科研產品銷售企業,公司自成立以來,秉承"全心全意服務于科研工作者"的企業理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發展現代生物科技,為各類大中小醫院及其它醫療機構、高等院校、科研院所、企事業單位提供優質的產品,服務生物科技領域的科學研究人員。

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服務流程
1)客戶提供材料
2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質
客戶提供
●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細胞、細菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝)
●詳細的背景資料:來源、特點、類型等
我們提供
基因組RNA/DNA提取、實驗報告
質量保證
高純度RNA/DNA、完整性
貨期
3-5個工作日
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
 f hundreds of genes involved in immune response, growth control, or protection against apoptosis. In addition to the NF-kappa-B inhibitors, phosphorylates several other components of the signaling pathway including NEMO/IKBKG, NF-kappa-B subunits RELA and NFKB1, as well as IKK-related kinases TBK1 and IKBKE. IKK-related kinase phosphorylations may prevent the overproduction of inflammatory mediators since they exert a negative regulation on canonical IKKs. Also phosphorylates other substrates including NCOA3, BCL10 and IRS1. Within the nucleus, acts as an adapter protein for NFKBIA degradation in UV-induced NF-kappa-B activation.
Subunit : Component of the I-kappa-B-kinase (IKK) core complex consisting of CHUK, IKBKB and IKBKG; probably four alpha/CHUK-beta/IKBKB dimers are associated with four 分子式:C18H14O8.H2O             
分子量:376.32            
英文名稱:(+)-Dibenzoyl-D-tartaric acid monohydrate            
1365純度:99%            
試劑名稱:1-丁基-3-甲基六氟磷酸鹽咪唑啉嗡            
NO.:174501-64-5            
分子式:C8H15N2.PF6             
分子量:284.18            
英文名稱:1-Butyl-3-methylimidazolium hexafluorophosphate            
1409純度:99%            
試劑名稱:乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸四鈉            
NO.:13368-13-3            
分子式:C14H20N2O10-4.4[Na+]             
分子量:468.2752            
英文名稱:6,9-Dioxa-3,12-diazatetradecanedioicacid, 3,12-bis(carboxymethyl)-, sodium salt (1:4)            
1023純度:AR,97%            
試劑名稱:2-羥基-1-萘甲酸            
NO.:2283-8-1            
分子式:C11H8O3             
分子量:188.18            

關鍵詞:移液器
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