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?0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個品牌

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  • 所在地上海市
  • 更新時間2017-06-12
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上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑等為一體的科研產品銷售企業,公司自成立以來,秉承"全心全意服務于科研工作者"的企業理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發展現代生物科技,為各類大中小醫院及其它醫療機構、高等院校、科研院所、企事業單位提供優質的產品,服務生物科技領域的科學研究人員。

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?0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個品牌操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
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1)客戶提供材料
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●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細胞、細菌等)
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least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 
Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 
產品介紹 The protein encoded by this gene, a member of the GAS2 family, is similar in sequence to the mouse protein Gas2, an actin-associated protein expressed at high levels in growth-arrested cells. Expression of the mouse Gas2 gene is negatively regulated by serum and growth factors. Three transcript variants encoding two different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Jul 2008]. 
Function : Seems to be involved in the cross-linking of microtubules and microfilaments.
?0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個品牌Subcellular Location : Cytoplasm, cytoskeleton (Probable). 
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Contains 1 CH (calponin-homology) domain. 
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Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q99501.2

 

關鍵詞:移液器
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