細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

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產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞株的培養和傳代培養：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10％小牛血清和抗生素的培養液中，培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養，根據細胞生長特性，在適當的時候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養上清液，用新鮮培養液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續培養。
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實驗操作步驟： 
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

兔血漿纖維蛋白原（RPF）瓊脂培養基基礎油酸山梨醇酯（司班80） 藥用級甘露醇瓊脂平板（USP）9cmpUNO1-hIFNB1

1%亞碲酸鉀溶液司班60 CP沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板（USP）9cmpUNO1-hIFNG

兔血漿（含 EDTA）司班60 色譜固定液SCDLP液體培養基管pUNO1-hIFNGR1

改良 GC 肉湯基礎司班40 CP1%葡萄糖肉湯管pUNO1-hIFNGR2

堿性蛋白胨水（APW）吐溫20 CP、中和管（50ml）pUNO1-hIFNK

培養基吐溫40 CP腸道菌增菌肉湯（顆粒）pUNO1-hIFNE

無菌堿性蛋白胨水（APW）吐溫40 LR腸道菌增菌液體培養基（顆粒）（2015藥典）pUNO1-hIFNW1

無菌單料堿性蛋白胨水（APW）吐溫60 CP改良Minca肉湯pUNO1-hIGF1a

TCBS 瓊脂吐溫60 LR沙氏瓊脂平板9cm（2~25℃）pUNO1-hIGF1Ra

TCBS 瓊脂平板環氧烷  99%無機磷培養基(不含瓊脂)（測磷細菌解磷效能）pUNO1-hIGF2

大鼠膀胱平滑肌細胞規格十二腈  98%頭孢曲松藥敏實驗紙片（擴散法） CRO 30ug酰肌肽Rat ANG-2(Angiopoietin-2) ELISA Kit

Rat PLAUR/uPAR(Urokinase plasminogen activator surface receptor) ELISA Kit

位十二內酯 98%環沙星藥敏實驗紙片（擴散法） CIP 5ug冷凍黃瓜Rat Fst(Follistatin) ELISA Kit

Rat INHA(Inhibin A) ELISA Kit

位庚內酯  98%諾氟沙星藥敏實驗紙片（擴散法） NOR 10ug使它隆Rat Gsk3a(Glycogen synthase kinase-3 alpha) ELISA Kit

Rat HIF-1α(Hypoxia-inducible factor 1-alpha) ELISA Kit

位庚內酯  ≥98%, FCC, Kosher氧氟沙星（泰利必妥） OFX 5ugβ-內酯Rat 5-HETE(5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit

Rat Ccl11(Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit

位庚內酯  Standard for GC ,>98.5% (GC)亞胺培南藥敏實驗紙片（擴散法） IPM 10ug鹽酸昂丹司瓊Rat 5-LO(Arachidonate 5-Lipoxygenase) ELISA Kit

Rat TPO(Thrombopoietin) ELISA Kit

椰子醛 98%氨芐西林/舒巴坦藥敏實驗紙片 SAM 20ugFmoc-S-三-L-青霉胺Rat Clu(Clusterin) ELISA Kit

Rat Cfd(Complement factor D) ELISA Kit

椰子醛 98%, FCC, Kosher恩諾沙星ENR 5ug豆漿粉Rat Fga(Fibrinogen alpha chain) ELISA Kit

Rat Fgg(Fibrinogen gamma chain) ELISA Kit

位壬內酯  98%替拉寧S-布洛芬Rat Fgb(Fibrinogen beta chain) ELISA Kit

Rat Lrp2(Low-density lipoprotein receptor-related protein 2) ELISA Kit

位壬內酯  98%, FCC, Kosher哌拉西林/他唑巴坦藥敏實驗紙片（擴散法） TZP 110ug1-雄烯-3-酮-4-雜氮-17b-羧酸Rat Alcam(CD166 antigen) ELISA Kit

Rat Ctgf(Connective tissue growth factor) ELISA Kit

位辛內酯  99%頭孢吡肟藥敏實驗紙片（擴散法） FEP 30ug4'-去基表鬼臼毒素Rat Cxcr1(C-X-C chemokine receptor type 1) ELISA Kit

Rat Tnfrsf8(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8) ELISA Kit